求助:关于原核表达包涵体蛋白纯化
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发布时间：2022-04-25 12:34
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时间：2024-07-23 21:08
蛋白质表达、分离、纯化可以：（1）探索和研究基因的功能以及基因表达的机理；（2）供作结构与功能的研究；（3）作为催化剂、营养剂等。
实验方法原理
携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中，在 37℃，IPTG诱导下，超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白，该蛋白可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸（NTA）使镍离子（Ni2+）固相化的层析介质加以提纯，实为金属熬合亲和层析（MCAC）。蛋白质的纯化程度可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。
实验材料
大肠杆菌BL21
试剂、试剂盒
LB液体培养基氨苄青霉素Washing BufferElution BufferIPTG蒸馏水胰蛋白胨酵母粉氯化钠
仪器、耗材
摇床离心机层析柱离心管移液头盒烧杯玻璃棒
抗体
CD2抗体
山羊Lambda Light Chain多克隆抗体
山羊Complement C4多克隆抗体
