什么是基因克隆载体?
发布网友
共1个回答
热心网友
单独一个包含启动子、编码区和终止子的基因，或者组成基因的某个元件，一般是不容易进入受体细胞的。即使采用理化方法进入细胞后，也不容易在受体细胞内稳定维持。把能够承载外源基因，并将其带入受体细胞（host：cell）得以稳定维持的DNA分子称为基因克隆载体（gene：cloning：vector）。
作为基因克隆载体一般应该具备以下条件：（1）在克隆载体合适的位置必须含有允许外源DN*段插入的克隆位点，并且这样的克隆位点应尽可能的多。作为克隆位点的*性内切核酸酶的识别序列一般在克隆载体上只有一个。为了便于多种类型末端的DN*段的克隆，克隆载体中往往组装一个含多种*性内切核酸酶识别序列的多克隆位点（MCS）连杆。
（2）克隆载体能携带外源DN*段（基因），容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好，或能停留在细胞质中进行自我复制；或能整合到染色体DNA、线粒体DNA和叶绿体DNA中，随这些DNA同步复制。
（3）克隆载体必须含有供选择转化子的标记基因，如根据转化子抗药性升降进行筛选的氨苄青霉素抗性基因（apsuperscriptrsuperscript或ampsuperscriptrsuperscript）、氯霉素抗性基因（cmsuperscriptrsuperscript）、卡那霉素抗性基因（kmsuperscriptrsuperscript或kansuperscriptrsuperscript）、链霉素抗性基因（smsuperscriptsuperscriptsm}}r）、四环素抗性基因（tcsuperscriptrsuperscript或tetsuperscriptrsuperscript）等，根据转化于蓝白颜色进行筛选的β-半乳糖苷酶基因（emphasis：role=italiclacZemphasis），以及表达产物容易观察和检测的报告基因emphasis：role=italicgusemphasis（β-葡萄糖苷酸酶基因）、emphasis：role=italicgfpemphasis（绿色荧光蛋白基因）等。
（4）克隆载体必须是安全的，不应含有对受体细胞有害的基因，并且不会任意转入除受体细胞以外的其他生物的细胞，尤其是人的细胞。
（5）容易插入外来核酸片段，容易从宿主细胞中分离纯化出来，便于重组操作。克隆载体在基因工程中占有十分重要的地位。目的基因能否有效转入受体细胞，并在其中维持和高效表达，在很大程度上取决于克隆载体。目前已构建和应用的基因克隆载体不下几千种，根据构建克隆载体所用的DNA来源可分为质粒载体、病毒或噬菌体载体、质粒DNA与病毒或噬菌体DNA组成的载体以及质粒DNA与染色体DN*段组成的载体等。
